氫氧化鉀拉絲實(shí)驗是一種快速鑒定革蘭氏陽(yáng)性菌的方法,主要是是用于區分革蘭陰性細菌和易脫色的革蘭陽(yáng)性細菌。
(1)、原理:革蘭陰性細菌的細胞壁在稀堿溶液中易于破裂,釋放出未斷裂的DNA螺旋,使氫氧化鉀菌懸液呈現粘性,可用接種環(huán)攪拌后拉出粘絲來(lái),而革蘭陽(yáng)性細菌在稀堿溶液中沒(méi)有上述變化;?
(2)、方法:取1滴40g/L氫氧化鉀水溶液(應新鮮配制)于潔凈玻片上,取新鮮菌落少許,與氫氧化鉀水溶液攪拌混勻,并每隔幾秒鐘上提接種環(huán),觀(guān)察能否拉出粘絲;?
(3)、結果:用接種環(huán)拉出粘絲者為陽(yáng)性,仍為混懸液者為陰性;???
(4)、應用:主要用于革蘭陰性菌與易脫色的革蘭陽(yáng)性菌的鑒別。大多數革蘭陰性菌于5~10s內出現陽(yáng)性反應,有的則需30~45s,假單胞菌、無(wú)色桿菌、黃桿菌、產(chǎn)堿桿菌、莫拉菌等大多數在10s內呈陽(yáng)性,不動(dòng)桿菌、莫拉菌反應較慢,大多數菌株在60s內出現陽(yáng)性,而革蘭陽(yáng)性菌在60s以后仍為陰性。
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